Descrizione
Il test degli anticorpi RBD Finecare 2019-nCoV è un test immunologico a fluorescenza utilizzato insieme agli strumenti FIA Finecare (modello n°: FS-113, FS-114, FS-205) per il rilevamento qualitativo e semiquantitativo del dominio di legame del recettore spike (RBD) anticorpi di nuovi coronavirus (2019-nCoV) nel sangue prelevato dal polpastrello, sangue prelevato in vena, siero o campione di plasma. Gli anticorpi RBD 2019-nCoV sono anticorpi protettivi prodotti dal corpo umano dopo l’inoculazione con il vaccino 2019-nCoV o l’infezione con 2019-nCoV. Il test è inteso come ausilio per valutare l’adattamento umorale.

Modalità d'uso
Raccolta e preparazione del campione:
Il test può essere eseguito con sangue, siero o plasma.
- Per sangue venoso:
In base alla procedura standard di raccolta del sangue venoso, raccogliere un campione di sangue prelevato in vena utilizzando una provetta per la raccolta del sangue con un anticoagulante adatto (contiene EDTA o eparina).
Testare immediatamente i campioni. Non lasciare i campioni a temperatura ambiente per periodi prolungati.
Se i campioni non vengono testati entro 8 ore, devono essere conservati a 2 °C – 8 °C per un massimo di 3 giorni.
- Per sangue da pungi dito:
Pulire l’area da incidere con un tampone imbevuto di alcol. Lasciare che il dito si asciughi completamente.
Utilizzare una lancetta sterile, forare la pelle all’estremità del polpastrello. Applicare una leggera pressione accanto al punto della puntura. Asciugare la prima goccia di sangue. Lasciare che si formi una nuova goccia di sangue. Se il flusso sanguigno è inadeguato, potrebbe essere necessario massaggiare delicatamente alla base del dito del paziente per produrre una goccia di volume sufficiente.
Prelevare 20 mcl di sangue dal dito con il campionatore capillare. Il campione di sangue raccolto dal polpastrello deve essere analizzato immediatamente.
- Per siero o plasma:
Secondo la procedura standard di flebotomia, raccogliere un campione di sangue prelevato in vena. Se è necessario raccogliere il plasma, utilizzare una provetta per il prelievo di sangue contenente un anticoagulante adatto (EDTA o eparina).
Separare il siero/plasma dal sangue il prima possibile per evitare l’emolisi.
Il test deve essere eseguito immediatamente dopo la raccolta del campione. Non lasciare i campioni a temperatura ambiente per periodi prolungati.
Se i campioni non vengono testati entro 8 ore, devono essere conservati a 2 °C – 8 °C per un massimo di 7 giorni. Per una conservazione superiore a 7 giorni, i campioni devono essere conservati ad una temperatura inferiore a -20 °C per un massimo di 15 giorni.
NOTA: Altri anticoagulanti non sono stati convalidati e potrebbero dare dei risultati errati. Portare i campioni a temperatura ambiente prima. I campioni congelati devono essere completamente scongelati e miscelati bene prima del test. I campioni non devono essere congelati e scongelati ripetutamente. Non raccomandato l’uso di campioni emolitici degradati o inattivi dal calore.
Esecuzione del test
Per informazioni complete e procedure operative, fare riferimento al manuale operativo degli strumenti FIA Finecare. Il test deve essere eseguito a temperatura ambiente.
- Preparazione:
Lasciare che la cartuccia del test e il campione raggiungano la temperatura ambiente (10 °C – 30 °C) prima del test.
Verificare che il numero di lotto della cartuccia di test corrisponda al chip ID. Inserire il chip ID negli strumenti FIA Finecare.
- Campionamento:
Per campioni di sangue venoso/siero/plasma, prelevare 20mcl di sangue con una pipetta di trasferimento ed aggiungerli nella provetta del tampone di rilevamento.
Per campioni di sangue prelevato dal polpastrello, prelevare 20mcl di sangue (nessuna forza esterna richiesta, il campionatore capillare aspira il campione di sangue da solo) dal dito con un campionatore capillare, quindi spremere il campione nella provetta del tampone di rilevamento.
- Miscelazione:
Chiudere il coperchio della provetta del tampone di rilevazione e mischiare accuratamente la miscela del campione agitandola bene.
- Caricamento:
Pipettare 75 mcl di miscela campione e caricarla nel pozzetto del campione della cartuccia del test.
- Test:
Sono disponibili due modalità di test per gli strumenti FIA Finecare, la modalità Standard Test e la modalità Quick Test. Fare riferimento al manuale d’uso dello strumento FIA Finecare per i dettagli.
Per la modalità di test Standard, inserire la cartuccia del test sul supporto della cartuccia del test dello strumento FIA Finecare subito dopo aver aggiunto la miscela del campione al pozzetto del campione. Premere “Test” per avviare il test. Il tempo di reazione della cartuccia del test è di 15 minuti.
Per la modalità di test Quick, per (solo FS-113, FS-114) impostare il timer e cronometrarlo subito dopo aver raggiunto la miscela del campione nel pozzetto del campione e attendere 15 minuti a temperatura ambiente. Quindi inserire la cartuccia di test sul supporto della cartuccia di test dello strumento FIA Finecare. Premere “Test” per avviare il test.
- Lettura dei risultati:
I risultati vengono visualizzati sulla schermata principale o possono essere stampati premendo “Print”.
- Smaltimento:
Gettare la cartuccia di test usata e gli altri contenuti del kit usato secondo le normative e le procedure locali dopo il rilascio dallo strumento.
Tutti i campioni e i kit usati presentano il rischio infettivo e devono essere eliminati dopo il primo utilizzo. Il processo di smaltimento del dispositivo diagnostico deve seguire le norme locali sullo smaltimento infettivo o regolamento di laboratorio.
- Interpretazione dei risultati:
Gli strumenti FIA Finecare visualizzano automaticamente il risultato del test sullo schermo. Il risultato verrà visualizzato in unità di fluorescenza relativa (RFU, AU/ml).
POSITIVO: ≥ 1 AU/ml (anticorpi 2019-nCoV RBD sono stati trovati).
NEGATIVO: < 1 AU/ml (anticorpi 2019-nCoV RBD non sono stati trovati).
NON VALIDO: Lo strumento mostra che il campione non è stato aggiunto (quando il segnale è inferiore al segnale minimo preimpostato) o la cartuccia è inserita al contrario (quando la cartuccia non ha il codice o il codice non è corretto).

Avvertenze
- Precauzioni
Questo prodotto è un reagente diagnostico in vitro monouso, non riutilizzare, non utilizzare prodotti scaduti.
La busta sigillata contiene una busta essiccante, che è solo a scopo di conservazione e non viene utilizzata nelle procedure di test.
Il test degli anticorpi RBD Finecare 2019-nCoV viene utilizzato solo in strumenti FIA Finecare (modello n°: FS-113, FS- 114, FS-205) prodotto da Wondfo Company.
Il test deve essere eseguito a temperatura ambiente (10 °C - 30 °C) e applicato da personale professionalmente formato che lavora in laboratori certificati o cliniche in cui il campione viene prelevato da personale medico qualificato.
La cartuccia del test deve rimanere nella sua busta sigillata originale fino all'uso. Non utilizzare una cartuccia di test danneggiata o un chip ID danneggiato.
Non è possibile mescolare reagenti con numeri di lotto diversi. Assicurarsi che la cartuccia di test, il chip ID e il tampone di rilevamento siano dello stesso lotto prima dell'uso.
La scomparsa della linea blu sulla finestra del test indicherà il dispositivo di test è stato utilizzato. Non riutilizzare tale dispositivo.
Indossare dispositivi di protezione individuale adeguati (ad es. guanti medici, maschera medica, occhiali protettivi e camice da laboratorio) quando si maneggia il contenuto di questo kit.
La raccolta, conservazione e il trasporto dei campioni sono fondamentali per l’esecuzione di questo test.
Tutti i campioni devono essere trattati come in grado di trasmettere malattie. Utilizzare le precauzioni appropriate nella raccolta, manipolazione, conservazione e smaltimento dei campioni di analisi e del contenuto del kit utilizzato. Seguire le linee guida di livello di biosicurezza 2 o superiore.
Non inserire una cartuccia di test bagnata con altri liquidi nello strumento, poiché ciò contaminerebbe o danneggerebbe lo strumento.
Non toccare l'area di reazione della striscia reattiva.
Non toccare l'estremità di inserimento del chip ID.
La cartuccia di test e lo strumento devono essere utilizzati lontano da vibrazioni e campi magnetici. Durante il normale utilizzo, lo strumento potrebbe introdurre piccole vibrazioni, che dovrebbero essere considerate normali.
Portare il dispositivo di prova a temperatura ambiente prima di aprire il sigillo. Il test deve essere eseguito nell'ambiente richiesto.
In caso di domande o suggerimenti durante l'uso di questo reagente, si prega di contattare il produttore.
- Limitazioni:
Questo reagente viene utilizzato solo per la diagnosi in vitro.
Questo reagente serve solo per testare siero, plasma e sangue. I risultati dei test con altri campioni o soluzioni possono essere errati.
La precisione del test dipende dal processo di raccolta del campione, la conservazione impropria del campione o il congelamento e lo scongelamento ripetuti dei campioni influenzeranno i risultati del test.
È ragionevole che l'ematocrito del campione di sangue sia compreso tra 30% e 60%. L'ematocrito del sangue < 30% o > 60% può causare i risultati errati.
Un risultato negativo del test potrebbe non escludere completamente la possibilità di un’infezione da 2019-nCoV. I campioni di siero o plasma fin della fase iniziale (pre sieroconversione) possono produrre risultati negativi. Pertanto, questo test non può essere utilizzato per diagnosticare un'infezione acuta. È stato anche riferito che ad alcuni pazienti con infezione confermata non si sviluppano anticorpi 2019-nCoV. Inoltre, in alcuni individui è stata segnalata una diminuzione dei titoli anticorpali entro un intervallo di mesi dall'infezione, una caratteristica che è stata segnalata anche per altri coronavirus.
Possono verificarsi risultati falsi negativi se il titolo degli anticorpi contro il virus 2019-nCoV presente nel campione è inferiore al limite di rilevamento del test.
Un risultato positivo potrebbe non indicare una precedente infezione 2019-nCoV. Prendere in considerazione altre informazioni, compresa la storia clinica e la malattia locale prevalenza, nel valutare la necessità di un secondo ma diverso test sierologico per confermare una risposta immunitaria.
Possono verificarsi risultati falsi positivi a causa di reattività crociata da preesistenti anticorpi o altre possibili cause.

Conservazione
Conservare a 4 °C – 30 °C nella confezione sigillata fino alla data di scadenza stampata sulla confezione. Non congelare.
Il dispositivo di test deve essere utilizzato entro 1 ora dall'estrazione dalla busta.
Tenere lontano dalla luce solare, dall'umidità e dal calore.
Il contenuto del kit è stabile fino alla data di scadenza stampata sulla confezione.
Validità a confezionamento integro: 24 mesi.

Formato
Contiene:
- 25 buste sigillate, le quali contengono 1 cartuccia di test e 1 busta essiccante.
- 1 chip ID.
- 25 pipette.
- 25 tamponi.

Bibliografia
[1] Ismail A A A. ANNALS EXPRESS: Serological tests for Covid-19 antibodies: limitations must be recognized [J]. Annals of Clinical Biochemistry, 2020, 57(4):000456322092705.
[2] Nie J, Wu X, Ma J, et al. Development of in vitro and in vivo rabies virus neutralization assays based on a high- titer pseudovirus system[J]. Rep, 2017, 7:42769.
[3] Liu S, Song D, Bai H, et al. A safe and reliable neutralization assay based on pseudovirus to measure neutralizing antibody titer against poliovirus[J]. Journal of Medical Virology, 2017, 89(12).